2024-11-24 00:31:50
PK琼脂培养基,也称为Pikovskaya'sAgar,是一种用于检测解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培养基。这种培养基的原理基于解磷微生物在生长过程中能够将不溶性的磷酸盐转化为可溶性形式,从而使得培养基中的磷酸钙溶解,导致培养基的透明度发生变化。**配方组成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸钙:5.0g-硫酸铵:0.5g-氯化钾:0.2g-硫酸镁:0.1g-硫酸锰:0.0001g-硫酸亚铁:0.0001g-琼脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸馏水重悬31.3g培养基。2.不断搅动并加热,煮沸1分钟使培养基完全溶解。3.121°C高压蒸汽灭菌15分钟。4.冷却至50°C时,分装15ml培养基到每个无菌培养皿中。**培养条件**:-通常在35°C下培养48小时。**观察指标**:-在PK琼脂培养基上生长的解磷微生物菌落周围的培养基由不透明变透明,通过观察培养基的透明度变化来判断微生物是否具有解磷能力。**保存条件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事项**:-避免吸入和皮肤接触。这种培养基在土壤微生物学、植物病理学和环境微生物学等领域有着广泛的应用,特别是在研究植物-微生物相互作用以及微生物对土壤养分循环的贡献方面。低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。改良阿须贝无氮琼脂培养皿
改良McBride琼脂基础(MMA)是一种用于微生物学研究和诊断的培养基,它具有一些特定的特点和用途:1.**选择性分离培养基**:改良McBride琼脂基础(MMA)主要用于李斯特氏菌的选择性分离。它通过添加特定的抗生物质或化学物质,抑制其他非目标微生物的生长,从而促进目标微生物——在这种情况下是李斯特氏菌的生长。2.**配方成分**:该培养基的配方包括酪胨、多价胨、牛肉浸粉、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、甘氨酸、氯化锂和琼脂等。这些成分为微生物提供了生长所需的营养物质和环境。3.**pH值**:改良McBride琼脂基础(MMA)的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃),这为李斯特氏菌的生长提供了适宜的酸碱环境。4.**添加物**:在使用时,每升培养基中需添加2.5g苯乙醇以及200mg环乙酰亚胺或30mg复达欣,这些添加物有助于抑制其他微生物的生长,提高李斯特氏菌分离的选择性。5.**高压灭菌**:在制备过程中,需要将培养基加热至完全溶解,然后进行121℃高压灭菌15分钟,以确保培养基的无菌性。6.**冷却和添加抗生物质**:灭菌后,培养基需要冷却至50℃,然后在无菌环境下加入抗生物质,备用。
TGY肉汤培养基(TryptoneGlucoseYeastBrothMedium)是一种用于微生物培养的培养基,特别适合于芽孢菌的培养。以下是它的一些主要特点和用途:1.**配方成分**:TGY肉汤培养基的主要成分包括胰蛋白胨(或胰酪蛋白胨)、酵母浸粉、葡萄糖和琼脂。胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖作为碳源和能源,琼脂用于固化培养基。2.**pH值**:该培养基的pH值通常控制在7.0至7.5之间,为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:TGY肉汤培养基主要用于细菌的培养,特别是对于需要营养丰富环境的细菌,如芽孢杆菌属的细菌。它也适用于细菌总数的测定和微生物的增菌培养。4.**配制方法**:通常需要称取一定量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌。灭菌后,冷却至适当温度,分装于无菌容器中备用。5.**质量控制**:通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌等,来验证培养基的性能。这些菌株在TGY肉汤培养基上应表现出良好的生长特性。6.**储存条件**:干燥培养基应放置于阴暗干燥处,室温保存。制备好的培养基应避免光线直接照射,并保存于2-8℃。
牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。在冷冻保存过程中,使用保护剂如甘油、血清、糖类等,可以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害 。
叠氮钠血琼脂基础(AzideBloodAgarBase)是一种选择性培养基,主要用于从粪便、污水和其他样本中分离和检测链球菌和葡萄球菌。以下是它的一些特点和配制方法:**特点**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、肉浸粉、氯化钠、叠氮钠和琼脂等成分,其中叠氮钠作为选择性抑制剂,对大多数革兰氏阴性菌具有抑制作用,但允许某些革兰氏阳性菌如链球菌和葡萄球菌的生长。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**应用**:除了用于分离培养链球菌和葡萄球菌,叠氮钠血琼脂基础还可用于测定溶血反应。4.**溶血反应**:在该培养基上,可以观察到α溶血(培养基变绿)、β溶血(菌落周围培养基变透明)和γ溶血(培养基无变化)。**配制方法**:1.称取33.2g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水中。2.加热煮沸至完全溶解。3.121℃高压灭菌15分钟。4.冷却至50℃左右,加入50mL无菌羊血,混匀后倒入无菌培养皿中。**注意事项**:-避免摄入、吸入、皮肤接触叠氮钠,配制时应在通风橱中进行,并佩戴适当的个人防护装备。-培养基中含有的叠氮钠具有剧毒,应妥善处理和保存。哥伦比亚肉汤能够支持包括细菌、酵母和霉菌在内的多种微生物的生长,尤其适合培养营养要求高的微生物。Schaedler琼脂预装培养皿
通常将卵磷脂吐温80营养琼脂培养基的粉成分溶解于蒸馏水中,加热煮沸以完全溶解,然后高压蒸汽灭菌15分钟。改良阿须贝无氮琼脂培养皿
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。