2024-11-04 03:05:20
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。TSFA是一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养,如细菌总数的测定,特别是适用于滤膜法细菌总数测定 。Dubos油酸琼脂平板
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。 3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂平板GAM肉汤用于厌氧菌的培养,是一般培养基的基础。它营养丰富,使用时无需加血,适用于各类厌氧菌的增菌 。
TYC培养基(TryptoneYeastCystineMedium)是一种用于分离口腔中链球菌(Streptococcusspp)的选择性培养基。它的特点包括:1.**成分**:TYC培养基通常包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亚硫酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、无水乙酸钠和蔗糖等成分,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**应用**:TYC培养基用于血链球菌的分离,可以添加杆菌肽(0.2U/ml)以增加选择性;也用于制备变形链球菌分离培养基。4.**配制方法**:称取本品98.0g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装后在121℃高压下灭菌15分钟,灭菌结束后摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。5.**质量控制**:通过使用特定的质控菌株进行测试,可以确保培养基支持目标菌株的生长。6.**储存条件**:未配制的培养基粉末应密封保存在阴凉干燥处。7.**结果观察**:在TYC培养基上,可以观察到细菌的生长情况,用于进一步的鉴定和分析。TYC培养基因其高选择性和特异性,是检测口腔中链球菌污染的重要工具。
蜡状芽孢杆菌琼脂基础(TSSB)是一种用于分离和培养蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:蜡状芽孢杆菌琼脂基础的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化钠、苯酚红和琼脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作为可发酵的糖,氯化钠维持渗透压,苯酚红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.2±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加剂**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黄乳液使用,每100ml蜡样芽孢杆菌选择性琼脂培养基基础中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黄乳液。5.**用法**:称取本品43.0g加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装每瓶100ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶加入10ml50%的无菌卵黄乳液和多粘菌素B10000IU混匀,倾入无菌平皿,备用。6.**菌落特征**:蜡样芽孢杆菌在TSSB上生长时,菌落通常为微粉红色,周围有淡粉红色沉淀环,这有助于识别蜡样芽孢杆菌。7.**质量控制**:进行微生物灵敏度试验时,按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。GC肉汤基础用于致病性奈瑟氏菌的分离,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-N抑菌剂、无菌血红蛋白粉各1支 。
胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)是一种常用的微生物固体培养基,广泛应用于各种细菌的分离和培养。以下是TSA培养基的一些关键特点:1.**成分**:TSA培养基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone,15g/L)、大豆胨(Soytone,5g/L)、氯化钠(5g/L)和琼脂(15g/L),这些成分为细菌提供氮源、维生素、生长因子以及维持渗透压和凝固培养基。2.**pH值**:TSA培养基的pH值通常调节在7.3±0.2(25℃),以满足大多数细菌生长的需要。3.**用途**:TSA培养基适用于多种细菌的培养,包括非选择性增菌培养及用于阪崎肠杆菌的纯化培养和产黄色素试验。4.**制备方法**:将TSA培养基的干粉加入到蒸馏水中,加热搅拌至完全溶解,通常分装到试管或平皿中,经过高压灭菌后备用。5.**保存条件**:未开封的TSA培养基通常在室温下避光保存,保质期可达三年。开封后应旋紧瓶盖,避免吸潮结块,并根据存放条件适当延长保存期。6.**注意事项**:在称量和操作过程中应注意无菌操作,避免微生物污染。使用后应立即旋紧瓶盖,防止吸潮。粉尘可能引起呼吸道不适,操作时应佩戴口罩。7.**应用**:TSA培养基在微生物学研究、医学诊断、食品检测和环境保护等领域有广泛应用。长双歧杆菌和婴儿双歧杆菌在PYG培养基上的生长情况通常表现为圆形凸起,奶油色,边缘整齐光滑的菌落 。霍乱双糖铁琼脂预装培养皿
TGC液体培养基不仅用于无菌试验,还可用于牛奶和乳制品中霉菌及酵母菌总数的测定。Dubos油酸琼脂平板
牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。Dubos油酸琼脂平板